贝克曼库尔特生命科学Biomek i-series自动化工作站与SCIEX BioPhase™ 8800高通量毛细管电泳在大样本量单抗CE-SDS纯度分析中的应用——同时分析不同浓度及不同前处理方式的样品。

CE-SDS技术在蛋白药物研发和质控中至关重要。药物开发各个阶段都有大量CE-SDS检测需要。特别是随着药物种类的多样化，单抗、双抗、融合蛋白和ADC等，不同类型蛋白药物CE-SDS检测的样品前处理条件也变得多样。生物药研发中，对CE-SDS提出更高的检测效率和通量需求，同时要求保持高分析灵敏度和分辨率，以优化研发流程，缩短产品研发周期，加快新药上市步伐。 

SCIEX高通量毛细管电泳BioPhase™ 8800系统

• 采用8通道毛细管并行处理样品，契合生物药研发通量效率和分析灵敏度的要求。

同时，与高通量检测相伴而行的是：如何提供同样高通量、高效率的样品前处理。

贝克曼库尔特生命科学Biomek i系列自动化工作站

• 支持全自动完成CE-SDS样品前处理，省去大量人工操作，消除潜在错误和误差。

BioPhase™ 8800与Biomek的联合，带来蛋白药物纯度高速分析的全新时代。

近期，贝克曼库尔特生命科学与SCIEX联合开发的Biomek与BioPhase™ 8800联用方案再次重磅升级。在之前方案测试前处理速度和96个样本重复性的基础上2（☞重磅！全自动、高通量CE-SDS样品前处理及分离分析流程来了！），本次升级测试针对生物药研发CE-SDS检测中面临的一次实验检测多种不同类型样品，包括浓度各异，样品和试剂混合比例不同，前处理样品缓冲类型或pH不同，需要检测非还原或还原等复杂场景，考察方法学重复性、线性等，进一步探索自动化代替人工操作的适用性和可靠性。

图1. Biomek i5 Span8自动化移液工作站（上），高通量毛细管电泳BioPhase™ 8800系统（中），BioPhase CE-SDS蛋白分子量&纯度分析试剂盒（下）

结果展示

01Biomek i-series同时执行多个样品不同前处理流程的便捷性考察

以mAb-2和mAb-3两种抗体测试多样品复杂前处理场景：

01  mAb-2及mAb-3初始浓度不同；

02  mAb-2分别与两种不同pH样品缓冲液混合； 

03  mAb-3同时做非还原和还原实验。

整个前处理过程不同样品取样量不同，添加试剂类型不同，体积不同，如果人工操作非常容易取错试剂或加错位置导致失误，造成结果异常。

使用Biomek i-series自动执行前处理操作，根据待移取试剂所在试剂槽不同，同时或依次吸取不同来源孔、不同体积的试剂或样品。Biomek i-series自动调整每根移液probe的移液量和间距，按照最短路径加入BioPhase™ 8800样品盘预设位置。全实验流程测试中，

Biomek i-series自动化工作站能便捷地完成复杂场景下的CE-SDS样品前处理。

02Biomek i-series抗体稀释准确性考察

对mAb-1抗体样品进行自动化样品稀释准确性考察。3份稀释后的样品实测浓度与理论浓度接近，三个重复样品的实测浓度重复性好，RSD值为2.53%。结果表明Biomek i-series自动化移液工作站稀释样品准确性高，样品稀释30.65倍，母液移取量仅1.2 μL仍获得很好的重复性和准确性。

表1. Biomek i-series自动化移液工作站稀释样品准确性结果 (n=3)

03不同样品不同CE-SDS前处理结果重复性考察

mAb-2和mAb-3抗体以不同CE-SDS处理方式各平行制备3份。从表2和表3结果可见，即使Biomek自动化工作站一次性执行了多种不同的移液过程，平行制备的3份样品迁移时间重复性RSD值为0.16%-0.47%，校准峰面积百分比重复性RSD值为0.02%-0.48%。结果表明，Biomek i-series自动化工作站平行制样准确度高，且BioPhase 8800不同通道毛细管重复性较好。

表2. mAb-2在不同pH样品缓冲液，非还原处理下的重复性结果 (n=3)

表3. mAb-3在还原和非还原前处理下的重复性结果 (n=3)

04线性准确度考察

抗体样品mAb-4在Biomek i-series自动化工作站进行逐级稀释，并与其他试剂混合制备CE-SDS-NR和CE-SDS-R样品，处理好的样品盘转移至BioPhase™ 8800系统进行数据采集。从图2非还原主峰 (NR) 和还原轻链 (R-LC) 、重链 (R-HC) 、非糖基化重链 (R-NGHC) 几个峰的线性结果看，各峰在0.1-2.0 mg/mL浓度下线性结果良好，非还原和还原的R2均在0.99以上，说明当前Biomek与BioPhase 8800联用方案线性准确度好。

图2. mAb-4样品CE-SDS-NR以及CE-SDS-R线性结果

Biomek i-series与BioPhase™ 8800联用方案主要优势

① 操作便捷，减少人为错误

贝克曼库尔特生命科学Biomek i-series自动化工作站可同时进行多样本复杂CE-SDS前处理，可适应样品浓度不同，试剂体积不同，试剂类型不同等场景，显著减少前处理人工步骤。8通道移液器可自动同时吸取不同体积的试剂加入对应样品孔，减少人工操作的误差和失误。

② 稳定性好，重复性高

• 联用方案结果准确度高，高浓度小体积稀释样品测量浓度与理论浓度接近，且RSD%小于3%；

• 不同样品不同前处理方式制备的CE-SDS样品，每个样品CE-SDS结果重复性好，主峰迁移时间和校正峰面积百分比的重复性均小于1%；

• 逐级稀释制备6个不同浓度的CE-SDS-NR和CE-SDS-R样品，线性化结果良好，非还原主峰和还原LC、HC、NGHC峰的线性曲线R2均大于0.99。

参考文献：

1.SCIEX Tech note：Biomek i-series自动化移液工作站与BioPhase™ 8800高通量毛细管电泳在大样本量单抗CE-SDS纯度分析中的应用——同时分析不同浓度及不同前处理的样品（MKT-33395-A）

2. SCIEX Tech note：Biomek i-series自动化移液工作站与BioPhase™ 8800联合用于单抗CE-SDS纯度分析（RUO-MKT-02-15616-ZH-A）